Percorrer por data de Publicação, começado por "2012-03-12"
A mostrar 1 - 1 de 1
Resultados por página
Opções de ordenação
- Estudo da actividade antimicrobiana de isolados provenientes de ambientes vulcânicos da Ilha Terceira - Açores - contra microrganismos indicadores relacionados com ambientes alimentaresPublication . Coelho, Márcia Catarina Mendes; Dapkevicius, Maria de Lurdes Nunes Enes; Gabriel, Cristina Riquelme; Dapkevicius, AiridasNo decurso das últimas décadas, muitas bactérias entre as quais, importantes patógenos de transmissão alimentar, adquiriram resistência aos antibióticos actualmente disponíveis, relançando a necessidade de pesquisar novas moléculas dotadas de actividade antimicrobiana. Os ambientes extremos albergam comunidades microbianas únicas, que podem ser exploradas como fontes de compostos com actividade antimicrobiana. Devido à sua natureza vulcânica, ocorrem nos Açores numerosos habitats terrestres extremos, como os tubos lávicos e as fumarolas, cujo potencial biotecnológico não foi ainda explorado. Este trabalho teve como objectivos caracterizar morfofisiologicamente isolados provenientes de biofilmes de tubos de lava - Terra Mole e Branca Opala - e de amostras de solo das fumarolas - Furnas do Enxofre; rastrear os microorganismos com actividade antimicrobiana contra microrganismos indicadores relacionados com ambientes alimentares; isolar e caracterizar preliminarmente as fracções dotadas de actividade antimicrobiana para os microrganismos com maior actividade. Estudaram-se 27 isolados provenientes de dois tubos lávicos e 3 isolados oriundos de fumarolas, situados na ilha Terceira. Todos os isolados foram caracterizados do ponto de vista morfofisiológico (morfologia das colónias, reacção ao Gram, catalase, oxidase, redução nitratos e mobilidade). A actividade antimicrobiana dos 30 isolados contra 8 microrganismos indicadores (Proteus sp., Salmonella Typhimurium ATCC 14028, E.coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococus aureus ATCC 9144, Staphylococus aureus ATCC 29523, Listeria innocua ATCC 33090, Listeria monocytogenes ATCC 7466) foi avaliada inicialmente por inoculação cruzada. Quatro isolados representativos com actividade antimicrobiana (GBO31C, GTM1B2, GBO69B e P2-1) foram seleccionados para o estudo do efeito das condições de cultivo sobre os parâmetros de crescimento (ODmax, μmax, e T.est.) e a actividade antimicrobiana, avaliada pelo ensaio de difusão em agar por inoculação em poços. Os isolados GBO31C, GTM1B2 e GBO69B foram identificados por sequenciação do gene que codificam o ARNr da subunidade 16S. O efeito do tipo de preparação da amostra (cultura inteira vs. sobrenadante) sobre a actividade antimicrobiana do isolado P2-1, foi avaliado pelo método de difusão em agar, por poços e discos. Por último procedeu-se à caracterização preliminar da actividade antimicrobiana do isolado P2-1, nomeadamente por ensaios de termoestabilidade, degradação enzimática e precipitação de proteínas com sulfato de amónio. Os 30 isolados em estudo apresentaram uma elevada diversidade fenotípica, estando representados entre eles 7 dos 16 grupos morfofisiológicos possíveis. A redução de nitratos (cerca de 40% dos isolados) e a mobilidade (23% de isolados móveis) foram frequentes. Dos isolados estudados, 77% inibiram pelo menos um dos 8 indicadores testados. No que toca aos locais de amostragem, todos os isolados obtidos a partir das fumarolas foram inibidores contra os microrganismos indicadores testados. Nos tubos lávicos, a frequência de isolados com antibiose foi superior nos tapetes amarelo e rosa. Os ensaios realizados com isolados do filo das Proteobactérias (GBO31C e GTM1B2) e isolado do género Enterococcus (GBO69B) permitiram compreender que as condições de incubação (temperatura e meio de cultura) influenciam a actividade antimicrobiana. Verificou-se também que as condições óptimas para a antibiose diferem das condições óptimas para o crescimento de cada microrganismo. A comparação dos resultados da avaliação da actividade antimicrobiana do GBO31C, GTM1B2 e P2-1 pelos métodos da inoculação cruzada e dos poços, indicou que o modo de vida em biofilme favoreceu a antibiose nestes isolados. O mesmo não se verificou em relação ao isolado GBO69B. O isolado P2-1 (G+Ox+Cat-n) apresentou actividade antimicrobiana de largo espectro. Observou-se que a remoção das células, o tratamento térmico a 100°C, a extracção por n-butanol e a adição das enzimas proteinase K, α-quimotripsina, tripsina e α-amilase não afectaram a actividade antimicrobiana deste isolado. Pelo contrário, o tratamento térmico a 121°C, com sulfato de amónio, com neutrase e a extracção com n-hexano e acetato de etilo, eliminaram a actividade antimicrobiana de culturas do P2-1. Isto indica que para a actividade antimicrobiana deste isolado deverão contribuir composto(s) proteico(s) de polaridade média. Os nossos dados indicam que as bactérias dos ambientes extremos dos Açores (ilha Terceira) poderão ser uma fonte promissora de antibióticos e de outros compostos antimicrobianos com interesse industrial.