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- Actividade antimicrobiana do Vaccinium cylindraceum : estudo da resposta e adaptação ao stress por citometria de fluxoPublication . Tavares, Ana Carolina de Lima; Silveira, Maria da GraçaActualmente verifica-se uma crescente preocupação relativamente aos conservantes sintéticos, e um número cada vez maior de consumidores opta por alimentos que contenham ingredientes naturais, ou seja, compostos com actividade antimicrobiana. Assim, o presente trabalho teve como objectivo o estudo da resposta ao stress e adaptação de células de Staphylococcus aureus, um dos patógenos responsável pela contaminação cruzada dos alimentos, ao extracto de Vaccinium cylindraceum, uma baga endémica dos Açores. O efeito do extracto nas células individuais de S. aureus foi estudado usando a capacidade de células desenergizadas em reter eficientemente a carboxifluoresceína (cF) como um indicador de actividade enzimática e de integridade da membrana, e a sua extrusão por transporte activo quando as células foram energizadas com glucose, como um indicador da capacidade de gerar energia metabólica. Verificou-se que o extracto de V. cylindraceum afecta a actividade metabólica das células de S. aureus, e que danifica a membrana citoplasmática, sugerindo que a dissipação do gradiente de membrana pode ser em parte responsável pela menor eficiência das células em gerar energia. A análise multiparamétrica por citometria de fluxo (CMF) de células de S. aureus crescidas na presença de extracto revelou que a população é heterogénea quanto à sua tolerância ao extracto de V. cylindraceum, tendo-se observado uma sub-população que se tornou mais robusta mantendo a integridade da membrana. No entanto, esta resposta adaptativa não foi evidente no que se refere à actividade metabólica destas células de S. aureus stressadas com V. cylindraceum. A análise por CMF de células marcadas com carboxifluoresceína diacetato (cFDA) e iodeto de propídio (IP) revelaram três subpopulações, i.e. células intactas (cF-fluorescentes), células danificadas (IP-fluorescentes) e células permeáveis (IP e cF-fluorescentes). Além do interesse fundamental subjacente à elucidação dos mecanismos envolvidos na resposta ao stress e adaptação de S. aureus ao extracto de V. cylindraceum alcançados no presente trabalho, fornecemos um método rápido para avaliar o estado fisiológico de células individuais de S. aureus, o que representa uma técnica poderosa para a indústria em termos de segurança alimentar.