Browsing by Author "Rocha, Sara Maria de Jesus Freitas"
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- Differentiation of reticulate and flange ingrowths of maize endosperm transfer cells.Publication . Rocha, Sara Maria de Jesus Freitas; Monjardino, Paulo Ferreira Mendes; Machado, Artur da CâmaraAs células de transferência do endosperma do milho (Zea mays L.) são especializadas no transporte de elevadas quantidades de assimilados para o grão. Devido a importância destas células para a produção dos grãos de milho vários estudos foram realizados para tentar compreender a formação deste tipo de células. No entanto, conhecimentos científicos recentes associados a novas tecnologias permitiram reavaliar conceitos antigos e explorar novos sobre a formação das células de transferência. No primeiro capítulo deste estudo caracterizamos o desenvolvimento das células de transferência do milho utilizando microscopia de campo largo, microscopia eletrónica de transmissão (TEM) e microscopia confocal a laser de varrimento (CLSM). Desta forma foi-nos possível perceber pela primeira vez e contrariamente a estudos prévios que as células de transferência do milho na sua camada mais basal formam invaginações reticuladas e flangeadas em paredes distintas. Tanto quanto sabemos esta característica ainda não foi descrita nas células de transferências ate agora estudadas, embora suspeitemos que outras espécies da família Poaceae possam ter característica idêntica. As camadas mais interiores das células de transferência formam unicamente invaginações flangeadas. Descreve-se também a estrutura e a ulta estrutura das invaginações, nomeadamente a compactação e a orientação das microfibrilas de celulose em ambos os tipos de invaginações durante o desenvolvimento das células de transferência. Recentemente foi demonstrado que os microtúbulos corticais orientam os movimentos dos complexos enzimáticos de celulose sintetase, controlando assim o tamanho e a forma das paredes celulares. Por seu lado, os complexos proteicos de γ- tubulina foram associados a síntese de novos microtúbulos. Assim no segundo capítulo descrevemos como os microtúbulos corticais e os complexos proteicos de γ-tubulina se associam a formação dos dois tipos distintos de invaginações comparando os resultados com as paredes celulares das células do endosperma amiláceo do milho que não desenvolvem invaginações. A utilização do CLSM permitiu-nos observar que nos microtúbulos, associados a síntese de invaginações flange, acentua-se a medida que os grãos se aproximam da maturação fisiológica. No caso das células de transferência, os níveis de lenhificação das invaginações são semelhantes aos das paredes adjacentes. Estes resultados entram em contradição com publicações anteriores que afirmavam que estas células não são lenhificadas. Neste estudo foram utilizadas tecnologias diferentes e mais sensíveis para a deteção de lenhina, nomeadamente a contrastação com permanganato de potássio e marcação com acriflavina, com visualização no TEM acoplado a espectroscopia de raios X por dispersão em energia e CLSM, respectivamente. Ambas as técnicas produziram resultados concordantes. A estes acresce a determinação de que o tratamento com peroxido de hidrogénio remove especificamente o conteúdo de algumas vesiculas adjacentes as invaginações reticuladas, mas não das paredes celulares e respetivas invaginações, contribuindo por isso para apoiar parcialmente as descobertas anteriores. A análise de crescimento revelou que a lenhificação ocorre simultaneamente com as fases de crescimento mais ativo, por isso não impede o crescimento celular. Este estudo contribuiu para aprofundar o conhecimento sobre a estrutura e a composição das invaginações durante o desenvolvimento das células de transferência assim como aumentar a perceção dos mecanismos biológicos envolvidos no desenvolvimento destas células essenciais a produção dos grãos de milho.