Percorrer por autor "Luz, Rúben Filipe Silva"
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- Biological activity screening of isolated freshwater and thermal water cyanobacteria from the AzoresPublication . Luz, Rúben Filipe Silva; Gonçalves, Vitor Manuel da Costa; Barreto, Maria do CarmoAs cianobactérias, procariotas fotossintéticos comuns em habitats lacustres, têm sido indicadas como uma importante fonte de metabolitos secundários com diversas atividades biológicas como anticancerígenas, antibacterianas, antifúngicas, anti inflamatórias, etc., conduzindo a um aumento da bioprospeção nestes organismos. Nos Açores, várias espécies de cianobactérias estão presentes em lagos e fontes termais, mas nenhuma atividade biológica foi testada até agora. Devido às condições ambientais e isolamento do arquipélago, as cianobactérias presentes nos Açores poderão possuir propriedades únicas e atividades biológicas de valor acrescentado. Neste trabalho foram recolhidas amostras de água e biofilmes de lagos e fontes termais nos Açores para a produção de culturas uni-algais de cianobactérias. O trabalho de isolamento permitiu a produção de 44 estirpes. A identificação destas estirpes permitiu enriquecer o conhecimento da flora de cianobactérias dos Açores, contribuindo no total com 12 novas espécies, para além de muitas por identificar e que provavelmente serão novas para a os Açores. Para o trabalho de bioprospecção, 20 estirpes foram selecionadas, isoladas de habitats termais e lagos, para os testes de atividade antioxidante, anti-acetilcolinesterase, antimicrobiana, de toxicidade e citotoxicidade. Todas as estirpes selecionadas apresentaram atividade em pelo menos um dos testes selecionados, com exceção da atividade antimicrobiana em que nenhuma apresentou atividade. Os resultados mais relevantes estão relacionados com os efeitos tóxicos e citotóxicos dos extratos das estirpes T07 e L30, pertencentes a cianobactérias nunca antes descritas com compostos tóxicos, mas também são de realçar as estirpes identificadas como potencial fonte de compostos com efeitos anti acetilcolinesterásico e antioxidante. Apesar do contributo significativo deste trabalho para o aumento do conhecimento sobre as cianobactérias nos Açores, os resultados mostram que as cianobactérias dos Açores continuam pouco estudadas, com uma grande diversidade taxonómica ainda por descrever. É também importante de referir as atividades aqui identificadas, que em trabalhos futuros poderão levar à elucidação estrutural de compostos com potenciais atividades na farmacologia e/ou biotecnologia.
- Using a polyphasic approach for exploring secondary metabolites from freshwater and thermal cyanobacteria strains from Azores islandsPublication . Luz, Rúben Filipe Silva; Gonçalves, Vítor Manuel da Costa; Vasconcelos, Vítor Manuel Oliveira; Urbatzka, RalphAs cianobactérias são microrganismos fotossintéticos com uma longa história evolutiva e uma elevada complexidade morfológica, ocupando uma grande diversidade de habitats, desde água doce a marinha, incluindo ambientes extremos. Esta diversidade é acompanhada por uma crescente complexidade do seu sistema taxonómico, baseado em caracteres ecológicos, morfológicos e genéticos, utilizando filogenias baseadas em marcadores genéticos específicos, e, mais recentemente, numa abordagem genómica, que contribuiu para a reformulação geral do sistema taxonómico das cianobactérias. A história evolutiva das cianobactérias permitiu-lhes adquirir genes específicos para a produção de metabolitos secundários de interesse. Entre estes, já foram identificados vários compostos bioativos de elevado valor, com significativo potencial citotóxico e no tratamento de doenças metabólicas. Neste trabalho foi efetuada uma revisão taxonómica das cianobactérias existentes nos Açores baseada nos registos anteriormente publicados e tendo em consideração a literatura mais recente sobre a taxonomia do grupo, contribuindo, assim, para o conhecimento da diversidade de cianobactérias na região. Para além disso, foi efetuado o estudo taxonómico das estirpes de cianobactérias depositadas no Banco de Algas e Cianobactérias dos Açores (BACA), provenientes de habitats aquáticos, terrestres, termais e salobros. Foram descritos cinco novos géneros e dez novas espécies: Azorothrix ramosa gen. & sp. nov., Radiculonema aquaticum gen. & sp. nov., Venetifunis florensis gen. & sp. nov., Tumidithrix elongata gen. & sp. nov., Pseudocalidococcus azoricus gen. & sp. nov., Pycnacronema lacustrum sp. nov., Pegethrix atlantica sp. nov., Kovacikia atmophytica sp. nov., Albertania obscura sp. nov. e Leptodesmis lacustris sp. nov.. Na descrição destes novos taxa foi utilizada uma abordagem polifásica baseada na morfologia (microscopia ótica e eletrónica de transmissão), na ecologia e em marcadores genéticos, nomeadamente, o gene do 16S rRNA e a região do espaço interno de transcrição do 16S-23S rRNA (ITS). Para a descrição da Pseudocalidococcus azoricus foi aplicada uma abordagem genómica de modo a melhorar o suporte genético. A elevada diversidade taxonómica de cianobactérias encontrada na coleção BACA reforçou a necessidade de se proceder uma pesquisa das suas potenciais bioatividades. Para esse efeito, selecionaram-se 56 estirpes do BACA que foram cultivadas em condições laboratoriais, tendo-se recuperado a sua biomassa por centrifugação seguida de liofilização e os seus compostos extraídos por metanol e sonicação. O meio de cultura utilizado na produção de biomassa foi recuperado após centrifugação, tendo sido filtrado e liofilizado. Os extratos foram testados quanto à sua citotoxicidade contra linhagens de células de carcinoma humano, HepG2 e HCT116, e atividade de redução de lípidos, através da utilização de larvas de peixe-zebra e um modelo de esteatose com células HepG2 sobrecarregadas com ácidos gordos. Foram identificados vários extratos com bioatividades promissoras nos ensaios de citotoxicidade (Scytonematopsis sp. BACA0005) e de redução de lípidos (Dulcicalothrix sp. BACA0344 e Pseudocalidococcus azoricus BACA0433), tendo alguns extratos demonstrado uma elevada toxicidade contra larvas de peixe-zebra (Symphyonema sp. BACA0090 e Aliinostoc sp. BACA0355). A análise da composição dos extratos por ESI-HR-LC-MS/MS revelou que a quimiodiversidade é determinada principalmente pela relação filogenética das estirpes, mais do que pelo seu habitat original. Os dados da metabolómica foram utilizados numa feature-based molecular network para identificação de vários picos de massa potencialmente ligados às bioatividades observadas. Esta abordagem destacou várias estirpes, classes de compostos e picos de massa como candidatos promissores para investigação futura de compostos bioativos, com potenciais aplicações em biotecnologia e produtos farmacêuticos. No geral, este trabalho reforça a importância dos Açores como uma fonte de recursos genéticos únicos, com um elevado impacto no sistema taxonómico das cianobactérias, e a necessidade de estudar estes novos recursos nos campos da biotecnologia e farmacêutica. A elevada variabilidade taxonómica e as bioatividades relatadas suportam a possível existência de vários novos compostos, biologicamente ativos e de elevado valor.
