Browsing by Author "Bouquet, A."
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- Transformation of somatic embryos of Vitis sp. (grapevine) with different constructs containing nucleotide sequences from nepovirus coat protein genesPublication . Gölles, R.; Machado, Artur da Câmara; Tsolova, V.; Bouquet, A.; Moser, R.; Lopes, Marco; Mendonça, D.; Katinger, H.; Machado, Margit L. da CâmaraO melhoramento de videiras, uma das plantas mais cultivadas no mundo, tal como muitas outras plantas lenhosas, é dificultado devido à sua elevada heterozigocidade genética e longo ciclo vegetativo. Assim a engenharia genética torna-se um instrumento importante num programa de melhoramento de videiras. Os nepovirus são os vírus da videira com maior importância económica devido à sua distribuição pelo mundo inteiro e aos graves danos que provocam. Um sistema de transformação genética através de Agrobacterium baseado na embriogénese somática repetitiva, foi utilizado para regenerar vinhas transgénicas. Culturas embriogénicas de Vitis vinifera (Russalka - auto-polinizada) e Richter 110 (Vitis rupestris x Vitis berlandieri) foram transformadas com Agrobacterium tumefaciens estirpe LBA 4404, contendo vários plasmídeos binários. pBinGUSint, transportando diferentes marcadores genéticos, ß-glucuronidase (GUS), e sete construções diferentes contendo quimeras do gene da proteína da cápsula do vírus do urticado da videira (GFLV) e do vírus mosaico-arábico (ArMV), incluindo formas não transcríveis e incompletas, respectivamente. Os embriões transformados foram selecionados através da sua contínua proliferação em meios contendo kanamicina. A expressão do gene marcador foi demonstrada através de análises histoquímicas do produto do gene GUS.