Ribeiro, Carlos2008-12-172008-12-172002-10-28http://hdl.handle.net/10400.3/199Tese de Doutoramento em Biologia, especialidade de Biologia Celular e MolecularApós uma actualização bibliográfica que faz o objecto da primeira parte e após a descrição dos meios técnicos e métodos na segunda parte, os resultados do nosso trabalho de investigação são expostos na terceira parte subdividida em quatro grandes capítulos. 1.- No primeiro destes capítulo fazemos um estudo dos hemócitos das espécies de lepidópteros que foram escolhidos para este estudo Mythimna unipuncta e Spodoptera littoralis ambos pertencentes à família Noctuidae. As grandes funções desempenhadas por cada um dos tipos celulares são descritas assim como o comportamento dos hemócitos in vitro. Isto permitir-nos-á descrever o estabelecimento e a afinação de um teste original de utilização dos hemócitos para o estudo das relações bactérias-insectos, que será utilizado no resto do nosso trabalho. Os resultados deste capítulo estão, em parte, reportados na nossa publicação n°1. 2.- O segundo capítulo é consagrado à evidenciação e descrição detalhada das actividades citotóxicas desenvolvidas pelo complexo nematobacteriano, principalmente, pela bactéria. São caracterizados cada um dos diferentes factores responsáveis pelas actividades citotóxicas. Este capítulo permitir-nos-á escolher, de entre todos os factores encontrados, aquele que nos pareceu o mais importante participante na depressão das reacções imunitárias induzidas pela bactéria. Será sobre o factor escolhido que incidirão os estudos desenvolvidos nos capítulos seguintes. Os resultados expostos neste quarto capítulo são os reportados nas nossas publicações n° 2 e 3. 3.- O terceiro capítulo é consagrado à purificação e à descrição bioquímica do principal factor que nós chamámos α-Xenorhabdolisina. Foram efectuados numerosos ensaios para esta purificação mas descreveremos essencialmente o método que nos permitiu obter uma fracção pura. Mostraremos que esta citotoxina é uma molécula do grupo muito importante das toxinas de origem bacteriana, que era totalmente desconhecida antes do nosso estudo. É a partir desta fracção totalmente purificada que podemos efectuar a continuação do nosso trabalho de investigação. 4.- No quarto capítulo descreveremos os efeitos deste factor citotóxico sobre as células alvo que são os hemócitos. Este estudo foi feito em microscopia óptica e electrónica. Permitiu-nos mostrar que em função das condições de aplicação, a α-Xenorhabdolisina poderia induzir quer a necrose quer a apoptose dos Na última parte substantiva do nosso trabalho está consagrado à discussão geral e conclusões, na qual faremos o estudo crítico dos resultados obtidos. Mostraremos que o factor citotóxico que purificámos e estudámos pode participar na depressão das reacções de imunidade celulares desenvolvidas pelo insecto. Discutiremos, em particular, a importância desta citotoxina no conjunto dos factores produzidos pela bactéria X. nematophila para colonizar o meio insecto. A finalizar apresentaremos a lista de referências bibliográficas consultadas no decurso do trabalho.porEnterobactériaFagocitoseImunidade CelularImunidade HumoralLuta Biológica IntegradaNemátodoMythimna unipuncta (Haworth)Spodoptera littoralisSteinernema carpocapsaeXenorhabdus nematophilaEfeito sobre os hemócitos de insectos de um factor citotóxico produzido pela bactéria Xenorhabdus nematophila (Enterobacteriaceae) : pesquisa de actividades citotóxicas : purificação e caracterização da citotoxinadoctoral thesis101098995